Lanzamiento Eclipse

Nueva tecnología: equipo Sievers Eclipse para determinación de endotoxinas en productos inyectables.

¿Qué es una endotoxina?

• Componente de la membrana celular externa de las bacterias Gram Negativas que es pirogénico, tras la inyección o la infección.
• Comprende el 75% de la membrana exterior.
• Funciones: rol en la integridad estructural, funciones fisiológicas, patógenas, inmunológicas y de transporte de nutrientes.

Características de una endotoxina

1. Ubicuidad. Existe en todas partes en la naturaleza: aire, piel, agua potable, agua de mar.
2. Potente toxicidad. Pirogénico: puede causar fiebre, dolor de cabeza, resfriado, náuseas, hipertensión, toxicidad pulmonar, aborto, sepsis y muerte.
3. Estabilidad. Muy difícil estabilizar y volver inactivo.
4. Probabilidad de ocurrencia. Por todas las razones enlistadas anteriormente, es muy probable que ocurra en la fabricación de dispositivos médicos y medicamentos parenterales.

Introducido a través de:

• Medicamentos inyectables
• Dispositivos médicos
• Cirugía
• Infección bacteriana

Importancia de las endotoxinas en la fabricación

1. Importancia de las endotoxinas en la fabricación
2. Usos del agua para la fabricación de medicamentos parenterales y fabricación de dispositivos médicos:
   • Producción de medicamentos.
   • Fermentación, lisis, purificación, etc.
   • Validación y limpieza.
   • Limpieza de cristalería, equipos y contenedores.
   • Pre-llenado o producto terminado.
   • Reconstitución del fármaco liofilizado antes de la administración del mismo.
   • Fabricación de dispositivos médicos.
   • Limpieza de dispositivos médicos.

¿Quién realiza las pruebas de endotoxinas?

Los fabricantes de:

• Todos los productos farmacológicos parenterales: Intravenosos (IV) / Intramuscular (IM) / Intratecal (IT).
• Dispositivos médicos que entran en contacto con la sangre.
• Productos veterinarios y de salud animal que entran en contacto con la sangre del animal.

Regulaciones para pruebas de endotoxinas bacterianas (BET)

Las endotoxinas están altamente reguladas de manera global a nivel mundial para garantizar una fabricación adecuada y la seguridad del paciente.

• Proporcionar orientación sobre materiales y métodos aceptables para las pruebas de endotoxinas bacterianas.
• Proporcionar criterios de aceptación para las condiciones y la validez de la prueba.
• Pueden tener requisitos de prueba o muestreo específicos para una industria o uso del producto.
• Ofrecer orientación sobre límites aceptables de endotoxinas y límites de dilución.
• USP, EP y JP están adaptados para proporcionar mensajes coherentes.
• Las regulaciones adicionales ayudan a reglamentar el registro de datos y la seguridad.

Reglamentaciones Globales de endotoxinas

Farmacopeas

• USP 85, “Bacterial Endotoxins Test”.
• JP 4.01, “Bacterial Endotoxins Test” EP 2.6.14, “Bacterial Endotoxins”.
• USP 161, “Transfusion and Infusion Assemblies and Similar Medical Devices”.
• USP 1211, “Sterilization and Sterility Assurance of Compendial Articles”.
• USP 1085, General Guidelines for BET currently being drafted.
• EP, 5.1.10, “Guidelines for Using the Test for Bacterial Endotoxins”.
• JP, 5, “Decision of Limit for Bacterial Endotoxins”.
• EP 2.6.32. Test for bacterial endotoxins using recombinant factor C.

Cumplimiento regulatorio para BET: Eclipse descripción general

La plataforma Eclipse BET está diseñada para cumplir con los requisitos generales:

• Curva estándar por duplicado: pre-depositado 50.0-0.005 EU/mL CV≥0.980
• Mediciones de OD de alta resolución: 5 lecturas / seg (no 1 lectura cada 30seg).
• Incubación y análisis a 37°C: Control de temperatura altamente estabilizado.
• Mezcla del lisado y la muestra en proporción 1:1 ración por IFU: precisa distribución automatizada de microfluídos.
• Controles positivos: pre-depositados 0.5 EU/mL por cada muestra.
• Controles negativos.
• Software compatible con CFR 21 parte 11 diseñado para la integridad de los datos.

¿Cómo se realiza la prueba de Endotoxinas Bacterianas (BET)?

Para los ensayos fotométricos y de coágulos en gel, el reactivo se deriva de la sangre de cangrejo herradura. Reactivo lisado de amebocitos de Limulus (LAL).

Limulus Polyphemus. Nombre en latín del cangrejo herradura en la costa atlántica de América del norte.

Amebocito. Células sanguíneas del cangrejo herradura.

Lisado. Extracto celular.

Las enzimas extraídas de las células sanguíneas del cangrejo herradura desencadenan una reacción en presencia de endotoxinas.

Ensayo Fotométrico

• Las muestras, controles y estándares se combinan con reactivos en microplaca. Placa de 96 pozos o placa de microfluídos de 104 pozos.
• El analizador mezcla e incuba muestras. Mezclado mediante agitación o rotación de placa.
• La fuente óptica y el detector monitorean el cambio de turbidez o color midiendo la densidad óptica (OD): Turbidimétrico – cambio en turbidez / cromogénico – cambio de color.
• Mida la OD en un tiempo establecido ó mida el tiempo para alcanzar una OD establecida. Punto final – medir la OD de todos los pozos en un tiempo establecido / cinética – monitorea continuamente los pozos y mide el tiempo para alcanzar un umbral de OD.

¿Cómo cambiaría mi rutina actual al usar la NUEVA TECNOLOGÍA DEL EQUIPO ECLIPSE?

SUEZ debe comprender primero el método o la técnica que se utiliza actualmente para cada muestra.

Escenarios:

Cromogénico cinético → Cromogénico cinético en Eclipse

La transición más directa con la bioquímica se mantiene constante al mantener la proporción de muestra y lisado 1:1

Una vez validado el sistema, se recomienda realizar un estudio puente.

Turbidimétrico cinético → Cromogénico cinético

Ejecutar “method suitability” para comparar la inhibición/mejora con el método turbidemetrico y demostrar la recuperación adecuada de endotoxinas con el método cromogénico.

Se recomienda realizar revalidación de tres lotes para la prueba final del producto validado.

Gel-coágulo → Cromogénico cinético

Ejecutar “method suitability” cómo se describe arriba.

Se recomienda realizar revalidación de tres lotes para la prueba final del producto validado. Independientemente del estado actual de las pruebas, Eclipse simplifica la transición a una plataforma optimizada de pruebas de endotoxinas.

Validación e Implementación del equipo ECLIPSE

El fabricante SUEZ ofrece lo siguiente:

• IQ/OQ/PQ Protocolos de Soporte de Validación (VSP) para validar integralmente el sistema.
• Servicio in-situ para la ejecución del VSP.
• Protocolo específico del software para ayudar en la validación del sistema.
• Protocolo puente, para ayudar a pasar de su plataforma cromogénica cinética actual a la plataforma Eclipse Suez.
• Protocolo de comparabilidad para ejecutar un estudio de comparación entre la plataforma automatizada de SUEZ y la plataforma de placa de 96 pozos.
• Informe completo de validación de la plataforma.

¿Cómo puede ayudarte la plataforma Eclipse SUEZ?

• Aumenta de un 75% en rendimiento por equipo.
• 51 min. ahorrados por ensayo [4 ensayos por día= 3h 20m ahorrados].
• Incremento en la eficiencia por reasignación de labores y reducción en la obtención de resultados.
• 89% en reducción en pipeteos.
• Reduce riego de lesiones por esfuerzo repetitivo.
• Mitigar rotación de personal.
• Simplificar programas de entrenamiento.
• Reducción de errores y posible contaminación.
• 90% reducción en uso de reactivo LAL.
• Segura cadena de suministro de LAL.
• Sustentabilidad del cangrejo herradura.
• Mantener relación de muestra a lisado 1:1

T5DC distribuidor autorizado de SUEZ en México.

¡Estamos a sus órdenes para atenderle!

Artículo original publicado en el portal de quiminet.com el 11 mayo 2021.